Аминокислотный анализатор АКА-1000 на базе хроматографа СКОРОХОД (Sevko&Co)

 

 

 

 

 Анализ аминокислот методом ВЭЖХ проводят с использованием методов предколоночной или постколоночной дериватизации, так как сами по себе они не поглощают свет в УФ – и видимой области спектра. Аминокислотный анализатор от компании Sevko & Co применяет подход постколоночной дериватизации, имеющей ряд преимуществ в точности и стабильности получаемых результатов вне зависимости от сложности (загрязненности) матрицы, концентрации гидролизованного белка. При этом, что немаловажно, метод является полностью автоматизированным.

 

* Посмотрим на сравнительную таблицу ниже, чтобы убедиться в приведенном тезисе.

 

 

 Сравнение методов 

Предколоночная  дериватизация	Постколоночная дериватизация
- обращено-фазовый механизм разделения	- ионообменный механизм разделения
- разделяются дериваты аминокислоты	- разделяются чистые аминокислоты
- сильное влияние матрицы на результаты анализа (образование побочных дериватов, конкурирующие реакции, ингибирование основной реакции): сниженная точность анализа и воспроизводимость по времени удерживания и площади пиков	- влияние матрицы отсутствует, так как ее компоненты не удерживаются на сорбенте
- нестойкость дериватов, полученных при помощи ортофталевого реагента (особенно влияет на воспроизводимость наиболее  удерживаемых АК: лизин, гистидин триптофан, аргинин и т.д.)	- влияние матрицы отсутствует, так как ее компоненты не удерживаются на сорбенте
- невозможность получения стабильных количественных результатов	- воспроизводимые результаты определения всех АК
- быстрая деградация ортофталевого реагента: необходимость готовить его каждый день заново	- стабильность дериватизующих реагентов вне зависимости от их природы: нингидрин или ортофталевый реагент, так как вся система инертизирована
- отсутствие возможности автоматизации при использовании фенилизотиоцианата в качестве дериватизующего агента. Ручная подготовка пробы: нагрев, высушивание досуха и перерастворение	- полная автоматизация процесса вне зависимости от используемого дериватизующего агента: нингидрина или ортофталевого реагента

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Постколоночная дериватизация является «золотым стандартом» при анализе аминокислот и используется в качестве поточного метода, а не от случая к случаю, если нужно провести единичный анализ, в отличие от предколоночной дериватизации.

Аминокислотный анализатор АКА-1000, как и вся продукция компании Sevko & Co, производится на собственных мощностях компании на площадке в Подмосковье по полному циклу. Аминокислотный анализатор представляет из себя жидкостной хроматограф «Скороход», в котором все детали и механизмы, соприкасающиеся с подвижной фазой и пробой, выполнены из инертных материалов (ПЭЭК, ПТФЭ, сапфир), что позволяет использовать высокосолевые буферы в качестве подвижной фазы, причем в приборе отсутствуют компоненты из западных стран, что обеспечивает

• - быстрые сроки производства и поставки (60 календарных дней);
• - стабильность и ритмичность производственного процесса;
• - независимость от санкционного давления третьих стран;
• - расширенный гарантийный период (2 года).    

​Аминокислотный анализатор АКА-1000 – это законченное решение для анализа аминокислот, которое готово к работе сразу из коробки. В комплект анализатора входят все необходимые реактивы на 500 анализов, приготовленные в лаборатории компании Sevko & Co, а также колонки собственного производства:

• - Буфер А1 – Na+/Li+ система
• - Буфер В1 –Na+/Li+ система
• - Буфер С1 –только Li+ система
• - Раствор для регенерации
• - Раствор для разбавления образцов
• - Нингидриновый реагент
• - Стандартная смесь аминокислот для построения калибровки
• - Аналитическая колонка с ионообменной смолой, в Na+ форме, 150 х 4,6 мм, 7 мкм для анализа до 20-ти основных аминокислот. Эту колонку обычно применяют при анализе гидролизатов белков в простых матрицах: кормах и комбикормах, фармпрепаратах.   
•  
• - Аналитическая колонка с ионообменной смолой, в Li+ форме, 150 х 4,6 мм, 7 мкм для анализа до 50-ти аминокислот. Эту колонку обычно применяют при проведении анализа в сложных матрицах: биологических жидкостях, экстрактах из растений, пищевых продуктах и напитках.
• - Фильтр-ловушка для аммиака
• - Демонстрация методики на вашей площадке
• - Методическая и сервисная поддержка в течение всего жизненного цикла анализатора от Производителя в РФ.

 

В классичекской конфигкрации анализатор снабжен спектрофотометрическим детектором с двумя фиксированными длинами волн (440 и 570 нм) и светодиодами в качестве источника излучения, а также модулем постколоночной дериватизации, представляющем из себя стандартный модуль из серии «Скороход», в который интегрированы термостат колонок, насос для подачи нингидринового реагента и высокотемпературный реактор.

 

   Модуль постколоночной дериватизации автономен и может быть сочленен с любой ВЭЖХ-системой. Эта разработка компании Sevko & Co имеет более чем десятилетний опыт успешного применения по всей России и странам ближнего зарубежья и явилась первым модулем, выпущенным компанией на рынок в 2013 г. и заложившим фундамент всему многообразию ВЭЖХ из серии «Скороход».

  Альтернативная конфигурация анализатора предполагает использование флуориметрического детектора со светодиодными источниками излучения и ортофталевого дериватизующего реагента, позволяющего определять аминокислоты в меньших концентрациях. лабораторий с малым объёмом проб.

 

 

В обоих конфигурациях используются светодиодные детекторы, имеющие ряд серьезных эксплуатационных преимуществ.

• Специфичная длина волны в отличие от ламп широкого спектра
• Более высокая светоотдача по сравнению с лампами широкого спектра
• Более высокая стабильность излучения, чем у ламп широкого спектра

БОЛЕЕ НИЗНИЕ ПРЕДЕЛЫ ОБНАРУЖЕНИЯ!

• Не требуют прогрева перед применением
• Служат в разы больше ламп широкого спектра, практически вечные, отсюда - существенная экономия ресурсов на обслуживание
• Гораздо более низкая стоимость детектора без компромиссов с чувствительностью: не требуется монохроматора, фильтров, источник питания для светодиодов дешевле, чем для ламп.

Безспульсационные насосы для подачи реагента и элюента

  Последовательный плунжерный механизм для беспрерывной подачи регентов, исключающей нестабильность и пульсации насоса. Благодаря высокой частоте и малому ходу (8 мкл) плунжеров вклад в пульсации системы отсутствует в отличие от традиционных длинноходовых насосов.

 

 

 

 

Производительность и высочайшая точность дозирования

  Уникальный для российского рынка автодозатор прямого дозирования пробы из иглы («split-loop»), обладающий высоким быстродействием (один цикл дозирования пробы с промывкой иглы до и после анализа составляет лишь 50 с) и вместимостью (153 х 2 мл) увеличивает производительность лаборатории кратно по сравнению с автодозаторами аспирационного типа («pulled-loop»). Высочайшая точность ввода пробы обеспечивается дозирующим насосом с шаговым двигателем разрешением 0,08 мкл на 1 шаг. Учитывая, что он используется в режиме деления шага 1 к 16, то дискретность дозирования получается равной всего-навсего 0,005 мкл, что позволяет дозировать объемы во всем диапазоне от 0,1 до 100 мкл с шагом 0,01 мкл точно и воспроизводимо.

 

 

 

 

Нулевой кросс-перенос

  Нулевой кросс-перенос обеспечивается проточным дизайном иглы, отсутствием лишних элементов в конструкции (инжекционный порт и дозирующий кран совмещены: отсутствует трансферная линия, нет буферной трубки в отличие от автодозаторов типа «pulled-loop»), а также активной промывкой внешней поверхности иглы. Внутренняя поверхность иглы непрерывно промывается подвижной фазой. Отбирается строго ваш аналитический объем. Нет потерь пробы, как в автодозаторах типа «pulled-loop», на заполнение длинной буферной трубки.

Масс-спектры, полученные на BrukerMaxis Impact HD (Q-TOF) с хроматографом "Скороход" в качестве фронтального ВЭЖХ: сверху –– пустая проба; снизу –– растительный экстракт. Условия: однократная промывка

 

Инертизация всей системы

 Дериватизующие реагенты, а также буферы, как и все жидкостные линии системы, находятся под подушкой инертного газа (N2), что позволяет избежать окислительной деструкции и загрязнения реагентов. Лоток для бутылей с системой подачи инертного газа снабжен регулятором давления, а также специальными крышками с клапанами, которые позволяют поддерживать давление газа в системе.

 

 

 

 

Интегрированный в насос или модуль для постколоночной дериватизации термостат колонок

Термостат колонок позволяет поддерживать высокие температуры (до 99 °С), необходимые для анализа аминокислот, с высокой точностью (±0.5 ℃) и стабильностью (±0.1℃).

 

 

 

 

 

 

 

Высокотемпературный реактор

Регулируемая температура реактора от 50 до 150 °С с катушкой-капилляром длиной до 30 м для проведения реакции дериватизации. Автоматическая промывка капилляра после каждой инжекции предотвращает его закупорку. Защита от перегрева и мониторинг давления в режиме реального времени позволяют проводить реакцию при высоких температурах.

Большие сенсорные экраны на каждом модуле

Позволяют отслеживать текущие и установленные параметры системы, производить автоматическую промывку жидкостных линий, экстренно выключать систему в случае возникновения внештатных ситуаций. Интуитивно понятная цветовая кодировка и возможность работы в перчатках делают повседневные операции комфортными и удобными для пользователя.

 

 

 

 

 

 

 

Система безопасности заботится об операторе и надлежащем

функционировании ВЭЖХ

  

• датчики течи во всех модулях;
• датчик открытия двери автодозатора с блокировкой движения манипулятора с иглой гарантирует отсутствие травм оператора;
• датчик распознавания типа планшета и его наличия предотвращает неправильную установку планшета и повреждение иглы;
• датчик отсутствия виалы: игла никогда не заколет воздух;
• система защиты иглы от изгиба или излома;
• защита от выхода давления за установленные пределы;
• защита от перегрева источников излучения в фотометрических детекторах.