Полномасштабная система для препаративной ВЭЖХ:
- автоинжектор
- один / два насоса (для осуществления разделения в режиме градиентного элюирования)
- один из трех детекторов (спектрофотометрический, диодноматричный или рефрактометрический с соответствующими препаративными ячейками)
- автоматический клапан выбора растворителя
- клапан переключения потоков для использования нескольких колонок
- коллектор фракций
Для сложных ситуаций возможно использование специальной комплектации (контроль чистоты фракций, регистрируемых на спектрофотометрическом детекторе, осуществляется при помощи масс-спектрометрического детектора).
Один лабораторный прибор дает возможность:
Функциональная схема, обеспечивающая все этапы работы хроматографа: |
Пример: разделение смеси в аналитическом (А) и препаративном (В) режимах |
В составе препаративного хроматографа могут работать следующие блоки:
Препаративный насос LC-20A
|
|
Ручной инжектор Rheodyne 7725i с синхронизацией старта
|
|
Автосамплер SIL-10AP
- от 1 до 400 мкл (опция) - от 1 до 2000 мкл (опция)
- флаконы 1,5 мл 100 (с охлаждением 60) - флаконы 4,0 мл 80 (с охлаждением 50)флаконы 13 мл 25
|
|
Автоматический клапан выбора растворителя FCV-130AL
|
|
Штатив колонок Column Holder 8A Может нести две препаративные колонки диам. 20-50 мм, одну аналитическую колонку, четыре ручных клапана переключения потоков, препаративный или аналитический миксер |
|
|
Детектор спектрофотометрический двухканальный SPD-20A/AV:
- аналитическая (стандарт): ход луча 10 мм, - препаративная (опция): ход луча 0,5 мм - препаративная (опция): ход луча 0,5-0,2-0,1 мм (сменные вставки) |
Детектор спектрофотометрический на основе диодной матрицы SPD-M20A (особенности этого детектора – см. рис. 2):
- аналитическая (стандарт): ход луча 10 мм - препаративная (опция): ход луча 0,5 мм - препаративная (опция): ход луча 0,5-0,2-0,1 мм (сменные вставки) |
|
Детектор рефрактометрический RID-20A:
|
|
Коллектор фракций FRC-10A:
|
|
Колонки препаративные и аналитические:
|
Рис. 2. Преимущества диодноматричного детектора
Колонка: Shodex Asahipak ODP-50 6D Элюенты: 0,05% TFA aq./CH3CN Лин. градиент: 80/20 to 50/50, 20 мин. Детектор: UV (220nm)
Обозначения пиков: 1. Lys-Брадикинин (1188 Да) 2. Брадикинин (1060 Да) 3. Met-Энкефалин (574 Да) 4. Нейротензин (1673 Да) 5. Leu-Энкефалин (556 Да) 6. Субстанция Р (1348 Да) 7. Бацитрацин (1450 Да) 8. Инсулин (5750 Да) 9. Инсулин (В-цепь) (3476 Да) 10. Лизоцим (14300 Да) 11. Мастопаран (1479 Да) 12. Миоглобин (17500 Да) |
Рис. 3. Пример разделения белков